कार्बापेनम-प्रतिरोधी हाइपरवी की नैदानिक ​​​​और आणविक विशेषताएं

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शंघाई में एक तृतीयक अस्पताल में कार्बापेनम-प्रतिरोधी उच्च-विषाणु क्लेबसिएला न्यूमोनिया की नैदानिक ​​और आणविक विशेषताएं
झोउ कांग, 1 वू कियांग, 1 हे लेकी, 1 झांग हुई, 1 जू माओसुओ, 1 बाओ युयुआन, 2 जिन झी, 3 फेंग शेन 11 नैदानिक ​​​​प्रयोगशाला चिकित्सा विभाग, शंघाई फिफ्थ पीपुल्स हॉस्पिटल, फुडन विश्वविद्यालय, शंघाई, पीपुल्स रिपब्लिक ऑफ चीन;2 शंघाई जियाओतोंग प्रयोगशाला चिकित्सा विभाग, शंघाई चिल्ड्रन हॉस्पिटल, शंघाई, पीपुल्स रिपब्लिक ऑफ चाइना;3 न्यूरोलॉजी विभाग, शंघाई फिफ्थ पीपुल्स हॉस्पिटल, फुडन यूनिवर्सिटी संबंधित लेखक: फेंग शेन, क्लिनिकल लेबोरेटरी मेडिसिन विभाग, शंघाई फिफ्थ पीपुल्स हॉस्पिटल, फुडन यूनिवर्सिटी, नंबर 128 रुइली रोड, मिन्हांग जिला, शंघाई, चाइनाटेल का पोस्टकोड 200240 +86 18021073261 ईमेल [ईमेल संरक्षित] पृष्ठभूमि: क्लेबसिएला न्यूमोनिया में कार्बापेनम प्रतिरोध और हाइपरवायरुलेंस के संलयन ने प्रमुख सार्वजनिक स्वास्थ्य चुनौतियों को जन्म दिया है।हाल के वर्षों में, कार्बापेनम-प्रतिरोधी उच्च-विषाणु क्लेबसिएला न्यूमोनिया (सीआर-एचवीकेपी) आइसोलेट्स पर अधिक से अधिक रिपोर्टें आई हैं।सामग्री और तरीके: तृतीयक अस्पताल में जनवरी 2019 से दिसंबर 2020 तक सीआर-एचवीकेपी से संक्रमित रोगियों के नैदानिक ​​डेटा मूल्यांकन का पूर्वव्यापी विश्लेषण।क्लेबसिएला न्यूमोनिया, क्लेबसिएला न्यूमोनिया (एचएमकेपी), कार्बापेनम-प्रतिरोधी क्लेबसिएला न्यूमोनिया (सीआर-एचएमकेपी) और कार्बापेनम-प्रतिरोधी उच्च-विषाणु निमोनिया की गणना 2 साल के भीतर एकत्र करें लेबेरेला (सीआर-एचवीकेपी) के आइसोलेट्स की संख्या।सीआर-एचवीकेपी आइसोलेट्स के प्रतिरोध जीन, विषाणु-संबंधी जीन, कैप्सुलर सीरोटाइप जीन और मल्टीलोकस सीक्वेंस टाइपिंग (एमएलएसटी) का पीसीआर पता लगाना।परिणाम: अध्ययन के दौरान कुल 1081 गैर-दोहराव वाले क्लेबसिएला न्यूमोनिया उपभेदों को अलग किया गया।, क्लेबसिएला न्यूमोनिया के 392 उपभेद (36.3%), सीआर-एचएमकेपी के 39 उपभेद (3.6%) और सीआर-एचवीकेपी के 16 उपभेद (1.5%) शामिल हैं।2019 में सीआर-एचवीकेपी के लगभग 31.2% (5/16) को अलग कर दिया जाएगा, और सीआर-एचवीकेपी के लगभग 68.8% (11/16) को 2020 में अलग कर दिया जाएगा। 16 सीआर-एचवीकेपी उपभेदों में से 13 स्ट्रेन एसटी11 हैं और सीरोटाइप K64, 1 स्ट्रेन ST11 और K47 सीरोटाइप है, 1 स्ट्रेन ST23 और K1 सीरोटाइप है, और 1 स्ट्रेन ST86 और K2 सीरोटाइप है।विषाणु-संबंधी जीन entB, fimH, rmpA2, iutA, और iucA सभी 16 CR-hvKP आइसोलेट्स में मौजूद हैं, इसके बाद mrkD (n=14), rmpA (n=13), एरोबैक्टिन (n=2) , AllS ( एन = 1)।16 सीआर-एचवीकेपी सभी को कार्बापेनमेस जीन ब्लैकेपीसी-2 और विस्तारित-स्पेक्ट्रम β-लैक्टामेज जीन ब्लैएसएचवी को अलग करता है।ERIC-PCR डीएनए फ़िंगरप्रिंटिंग के परिणामों से पता चला है कि 16 CR-hvKP स्ट्रेन अत्यधिक बहुरूपी थे, और प्रत्येक स्ट्रेन के बैंड काफी भिन्न थे, जो एक छिटपुट अवस्था दिखाते थे।निष्कर्ष: हालांकि सीआर-एचवीकेपी छिटपुट रूप से वितरित किया जाता है, यह साल दर साल बढ़ रहा है।साल।इसलिए, नैदानिक ​​​​ध्यान जगाया जाना चाहिए, और सुपरबग सीआर-एचवीकेपी के क्लोनिंग और प्रसार से बचने के लिए आवश्यक उपाय किए जाने चाहिए।कीवर्ड: क्लेबसिएला न्यूमोनिया, कार्बापेनम प्रतिरोध, उच्च विषाणु, उच्च बलगम, महामारी विज्ञान
क्लेबसिएला न्यूमोनिया एक अवसरवादी रोगज़नक़ है जो विभिन्न प्रकार के संक्रमणों का कारण बन सकता है, जिसमें निमोनिया, मूत्र पथ के संक्रमण, बैक्टेरिमिया और मेनिन्जाइटिस शामिल हैं।1 पिछले तीस वर्षों में, क्लासिक क्लेबसिएला न्यूमोनिया (सीकेपी) के विपरीत, एक नया अत्यधिक विषैला क्लेबसिएला न्यूमोनिया (एचवीकेपी) हाइपरम्यूकोसल म्यूकस एक चिकित्सकीय रूप से महत्वपूर्ण रोगज़नक़ बन गया है, जो अत्यधिक आक्रामक संक्रमणों में पाया जा सकता है, जैसे कि लिवर में फोड़े स्वस्थ शरीर में होते हैं। और इम्युनोकॉम्प्रोमाइज्ड व्यक्ति।2 यह ध्यान देने योग्य है कि ये संक्रमण आमतौर पर विनाशकारी प्रसार संक्रमणों के साथ होते हैं, जिनमें एंडोफथालमिटिस और मेनिन्जाइटिस शामिल हैं।3 उच्च म्यूकोसल म्यूकोसल फेनोटाइप एचवीकेपी का उत्पादन आमतौर पर कैप्सुलर पॉलीसेकेराइड के बढ़ते उत्पादन और आरएमपीए और आरएमपीए 2.4 जैसे विशिष्ट विषाणु जीन की उपस्थिति के कारण होता है।उच्च बलगम फेनोटाइप आमतौर पर "स्ट्रिंग टेस्ट" द्वारा निर्धारित किया जाता है।रक्त अगर प्लेटों पर रात भर उगाई जाने वाली क्लेबसिएला न्यूमोनिया कॉलोनियों को एक लूप के साथ खींचा जाता है।जब >5 मिमी की लंबाई वाली एक चिपचिपी रस्सी बनती है, तो "रस्सी परीक्षण" सकारात्मक होता है।5 हाल के एक अध्ययन से पता चला है कि peg-344, iroB, iucA, rmpA rmpA2 और rmpA2 ऐसे बायोमार्कर हैं जो hvkp की सटीक पहचान कर सकते हैं।इस अध्ययन में, अत्यधिक विषैले क्लेबसिएला न्यूमोनिया को अत्यधिक बलगम चिपचिपा फेनोटाइप (सकारात्मक स्ट्रिंग परीक्षण परिणाम) के रूप में परिभाषित किया गया था और क्लेबसिएला न्यूमोनिया विषाणु प्लास्मिड संबंधित साइटों (आरएमपीए 2, आईयूटीए, आईयूसीए) को ले जाने के रूप में 1980 के दशक में, ताइवान के मामले की रिपोर्ट में पहली बार समुदाय का वर्णन किया गया था। -अक्वायर्ड लिवर फोड़े जो एचवीकेपी के कारण होता है, साथ में गंभीर अंत-अंग क्षति, जैसे मेनिन्जाइटिस और एंडोफ्थेलमिटिस।7,8 एचवीकेपी का एशिया, यूरोप और अमेरिका के कई देशों में छिटपुट संचरण है।हालाँकि यूरोप और अमेरिका में hvKP के कई मामले सामने आए हैं, लेकिन hvKP की व्यापकता मुख्य रूप से एशियाई देशों, विशेषकर चीन में हुई है।9
सामान्य तौर पर, एचवीकेपी एंटीबायोटिक दवाओं के प्रति अधिक संवेदनशील होता है, जबकि कार्बापेनम-प्रतिरोधी क्लेबसिएला निमोनिया (सीआरकेपी) कम विषैला होता है।हालांकि, दवा प्रतिरोध और विषाणु प्लास्मिड के प्रसार के साथ, सीआर-एचवीकेपी को पहले झांग एट अल द्वारा वर्णित किया गया था।2015 में, और अधिक से अधिक घरेलू रिपोर्टें हैं।10 चूंकि सीआर-एचवीकेपी गंभीर और इलाज में मुश्किल संक्रमण का कारण बन सकता है, अगर एक महामारी क्लोन दिखाई देता है, तो यह अगला "सुपरबग" बन सकता है।आज तक, सीआर-एचवीकेपी के कारण होने वाले अधिकांश संक्रमण छिटपुट मामलों में हुए हैं, और छोटे पैमाने पर प्रकोप दुर्लभ हैं।11,12
वर्तमान में, सीआर-एचवीकेपी की पहचान दर कम है, और कुछ संबंधित अध्ययन हैं।सीआर-एचवीकेपी की आणविक महामारी विज्ञान विभिन्न क्षेत्रों में अलग है, इसलिए इस क्षेत्र में सीआर-एचवीकेपी के नैदानिक ​​वितरण और आणविक महामारी विज्ञान विशेषताओं का अध्ययन करना आवश्यक है।इस अध्ययन ने सीआर-एचवीकेपी के प्रतिरोध जीन, विषाणु-संबंधी जीन और एमएलएसटी का व्यापक विश्लेषण किया।हमने पूर्वी चीन के शंघाई में एक तृतीयक अस्पताल में सीआर-एचवीकेपी की व्यापकता और आणविक महामारी विज्ञान की जांच करने की कोशिश की।शंघाई में सीआर-एचवीकेपी की आणविक महामारी विज्ञान को समझने के लिए इस अध्ययन का बहुत महत्व है।
जनवरी 2019 से दिसंबर 2020 तक फुडन विश्वविद्यालय से संबद्ध शंघाई फिफ्थ पीपुल्स हॉस्पिटल से गैर-दोहराव वाले क्लेबसिएला न्यूमोनिया को पूर्वव्यापी रूप से एकत्र किया गया था, और एचएमकेपी, सीआरकेपी, सीआर-एचएमकेपी और सीआर-एचवीकेपी के प्रतिशत की गणना की गई थी।सभी आइसोलेट्स की पहचान VITEK-2 कॉम्पैक्ट ऑटोमैटिक माइक्रोबियल एनालाइजर (बायोमेरीक्स, मार्सी ल'एटोइल, फ्रांस) द्वारा की गई थी।मालदी-टोफ मास स्पेक्ट्रोमेट्री (ब्रूकर डाल्टनिक्स, बिलरिका, एमए, यूएसए) का उपयोग बैक्टीरिया के उपभेदों की पहचान को फिर से करने के लिए किया गया था।उच्च बलगम फेनोटाइप "स्ट्रिंग टेस्ट" द्वारा निर्धारित किया जाता है।जब इमिपेनेम या मेरोपेनेम प्रतिरोधी होता है, तो कार्बापेनम प्रतिरोध एक दवा संवेदनशीलता परीक्षण के माध्यम से निर्धारित किया जाता है।अत्यधिक विषैला क्लेबसिएला न्यूमोनिया को एक उच्च बलगम फेनोटाइप (सकारात्मक स्ट्रिंग परीक्षण परिणाम) और क्लेबसिएला न्यूमोनिया विषाणु प्लास्मिड संबंधित साइटों (rmpA2, iutA, iucA) को ले जाने के रूप में परिभाषित किया गया है।
5% भेड़ रक्त अगर प्लेट पर एक एकल क्लेबसिएला न्यूमोनिया कॉलोनी को टीका लगाया गया था।37 डिग्री सेल्सियस पर रात भर इनक्यूबेट करने के बाद, धीरे से कॉलोनी को एक इनोकुलेटिंग लूप के साथ खींच लें और 3 बार दोहराएं।यदि एक चिपचिपी रेखा तीन बार बनती है और लंबाई 5 मिमी से अधिक है, तो "लाइन परीक्षण" को सकारात्मक माना जाता है, और तनाव में एक उच्च बलगम फेनोटाइप होता है।
VITEK-2 कॉम्पैक्ट स्वचालित माइक्रोबियल विश्लेषक (बायोमेरीक्स, मार्सी एल'एटोइल, फ्रांस) में, ब्रोथ माइक्रो-कमजोर पड़ने से कई आमतौर पर इस्तेमाल किए जाने वाले एंटीबायोटिक दवाओं के लिए रोगाणुरोधी संवेदनशीलता का पता चला था।परिणामों की व्याख्या क्लिनिकल एंड लेबोरेटरी स्टैंडर्ड इंस्टीट्यूट (CLSI, 2019) द्वारा विकसित मार्गदर्शन दस्तावेज के अनुसार की जाती है।ई. कोलाई एटीसीसी 25922 और क्लेबसिएला न्यूमोनिया एटीसीसी 700603 का उपयोग रोगाणुरोधी संवेदनशीलता परीक्षण के लिए नियंत्रण के रूप में किया गया था।
सभी क्लेबसिएला न्यूमोनिया आइसोलेट्स के जीनोमिक डीएनए को TIANamp बैक्टीरिया जीनोमिक डीएनए किट (टियांगेन बायोटेक कंपनी लिमिटेड, बीजिंग, चीन) द्वारा निकाला गया था।विस्तारित-स्पेक्ट्रम β-लैक्टामेज जीन (blaCTX-M, blaSHV और blaTEM), कार्बापेनमेस जीन (blaKPC, blaNDM, blaVIM, blaIMP और blaOXA-48) और 9 प्रतिनिधि विषाणु-संबंधी जीन, जिनमें pLVPK प्लास्मिड-जैसे लोकी (allS, fimH) शामिल हैं। , mrkD, entB, iutA, rmpA, rmpA2, iucA, और aerobactin) पीसीआर द्वारा प्रवर्धित किए गए थे जैसा कि पहले वर्णित है।13,14 कैप्सुलर सीरोटाइप-विशिष्ट जीन (K1, K2, K5, K20, K54, और K57) को ऊपर वर्णित अनुसार पीसीआर द्वारा प्रवर्धित किया गया था।14 यदि ऋणात्मक है, तो कैप्सुलर सीरोटाइप-विशिष्ट जीन को निर्धारित करने के लिए wzi ठिकाने को बढ़ाना और अनुक्रमित करना।15 इस अध्ययन में प्रयुक्त प्राइमरों को तालिका S1 में सूचीबद्ध किया गया है।सकारात्मक पीसीआर उत्पादों को नेक्स्टसेक 500 सीक्वेंसिंग प्लेटफॉर्म (इलुमिना, सैन डिएगो, सीए, यूएसए) द्वारा अनुक्रमित किया गया था।एनसीबीआई वेबसाइट (http://blast.ncbi.nlm.nih.gov/Blast.cgi) पर ब्लास्ट चलाकर न्यूक्लियोटाइड अनुक्रमों की तुलना करें।
पाश्चर इंस्टीट्यूट एमएलएसटी वेबसाइट (//bigsdb.pasteur.fr/klebsiella/klebsiella.html) में वर्णित के रूप में मल्टी-साइट अनुक्रम टाइपिंग (एमएलएसटी) का प्रदर्शन किया गया था।सात हाउसकीपिंग जीन गैपए, इनफबी, एमडीएच, पीजीआई, फोई, आरपीओबी और टनबी को पीसीआर द्वारा प्रवर्धित किया गया और अनुक्रमित किया गया।अनुक्रम प्रकार (ST) को MLST डेटाबेस के साथ अनुक्रमण परिणामों की तुलना करके निर्धारित किया जाता है।
क्लेबसिएला न्यूमोनिया की समरूपता का विश्लेषण किया गया।क्लेबसिएला न्यूमोनिया जीनोमिक डीएनए को एक टेम्पलेट के रूप में निकाला गया था, और ईआरआईसी प्राइमरों को तालिका एस 1 में दिखाया गया है।पीसीआर जीनोमिक डीएनए को बढ़ाता है और जीनोमिक डीएनए के फिंगरप्रिंट का निर्माण करता है।2% agarose gel वैद्युतकणसंचलन द्वारा 16 PCR उत्पादों का पता लगाया गया।क्वांटिटीऑन सॉफ्टवेयर बैंड मान्यता का उपयोग करके डीएनए फिंगरप्रिंटिंग परिणामों की पहचान की गई थी, और अंकगणितीय माध्य के अनवीटेड पेयर ग्रुप मेथड (यूपीजीएमए) का उपयोग करके आनुवंशिक विश्लेषण किया गया था।समानता वाले आइसोलेट्स> 75% को एक ही जीनोटाइप माना जाता है, और समानता वाले <75% को अलग-अलग जीनोटाइप माना जाता है।
डेटा का विश्लेषण करने के लिए Windows 22.0 के लिए सांख्यिकीय सॉफ़्टवेयर पैकेज SPSS का उपयोग करें।डेटा को माध्य ± मानक विचलन (एसडी) के रूप में वर्णित किया गया है।श्रेणीबद्ध चर का मूल्यांकन ची-स्क्वायर परीक्षण या फिशर के सटीक परीक्षण द्वारा किया गया था।सभी सांख्यिकीय परीक्षण 2-पूंछ वाले होते हैं, और <0.05 का P मान सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण माना जाता है।
फुडन यूनिवर्सिटी से संबद्ध शंघाई फिफ्थ पीपुल्स हॉस्पिटल ने 1 जनवरी, 2019 से 31 दिसंबर, 2020 तक 1081 क्लेबसिएला न्यूमोनिया आइसोलेट्स एकत्र किए, और एक ही रोगी से डुप्लिकेट आइसोलेट्स को बाहर रखा।उनमें से, 392 उपभेद (36.3%) एचएमकेपी थे, 341 उपभेद (31.5%) सीआरकेपी थे, 39 उपभेद (3.6%) सीआर-एचएमकेपी थे, और 16 उपभेद (1.5%) सीआर-एचवीकेपी थे।गौरतलब है कि 2019 से सीआर-एचएमकेपी का 33.3% (13/39) और सीआर-एचवीकेपी का 31.2% (5/16), सीआर-एचएमकेपी का 66.7% (26/39) और 68.8% (11/16) है। ) सीआर-एचवीकेपी को 2020 से अलग किया गया था। थूक (17 उपभेदों), मूत्र (12 उपभेदों), जल निकासी द्रव (4 उपभेदों), रक्त (2 उपभेदों), मवाद (2 उपभेदों), पित्त (1 अलगाव) और फुफ्फुस बहाव से (1 अलगाव), क्रमशः।थूक (9 आइसोलेट्स), मूत्र (5 आइसोलेट्स), रक्त (1 आइसोलेट) और फुफ्फुस बहाव (1 आइसोलेट) से सोलह प्रकार के सीआर-एचवीकेपी बरामद किए गए।
स्ट्रेन आइडेंटिफिकेशन, ड्रग सेंसिटिविटी टेस्ट, स्ट्रिंग टेस्ट और वायरलेंस से संबंधित जीन डिटेक्शन के जरिए 16 सीआर-एचवीकेपी स्ट्रेन की जांच की गई।सीआर-एचवीकेपी आइसोलेट्स से संक्रमित 16 रोगियों की नैदानिक ​​​​विशेषताओं को तालिका 1 में संक्षेपित किया गया है। 16 रोगियों में से 13 (81.3%) पुरुष थे, और सभी रोगी 62 वर्ष से अधिक उम्र के थे (औसत आयु: 83.1 ± 10.5 वर्ष)।वे 8 वार्डों से आए थे, और आधे से अधिक केंद्रीय आईसीयू (9 मामले) से आए थे।बुनियादी बीमारियों में सेरेब्रोवास्कुलर रोग (75%, 12/16), उच्च रक्तचाप (50%, 8/16), क्रॉनिक ऑब्सट्रक्टिव पल्मोनरी डिजीज (50%, 8/16), आदि शामिल हैं। इनवेसिव सर्जरी में मैकेनिकल वेंटिलेशन (62.5%, 10/ 16), मूत्र कैथेटर (37.5%, 6/16), गैस्ट्रिक ट्यूब (18.8%, 3/16), सर्जरी (12.5%, 2/16) और अंतःशिरा कैथेटर (6.3%, 1/16)।16 रोगियों में से नौ की मृत्यु हो गई, और 7 रोगियों में सुधार हुआ और उन्हें छुट्टी दे दी गई।
39 CR-hmKP आइसोलेट्स को स्टिकी स्ट्रिंग की लंबाई के अनुसार दो समूहों में विभाजित किया गया था।उनमें से, चिपचिपा स्ट्रिंग लंबाई 25 मिमी के साथ 20 सीआर-एचएमकेपी आइसोलेट्स को एक समूह में विभाजित किया गया था, और 19 सीआर-एचएमकेपी चिपचिपा स्ट्रिंग लंबाई> 25 मिमी के साथ दूसरे समूह में विभाजित किया गया था।पीसीआर विधि विषाणु-संबंधी जीन rmpA, rmpA2, iutA और iucA की सकारात्मक दर का पता लगाती है।दो समूहों में सीआर-एचएमकेपी विषाणु-संबंधी जीन की सकारात्मक दरों को तालिका 2 में दिखाया गया है। दो समूहों के बीच सीआर-एचएमकेपी विषाणु-संबंधी जीन की सकारात्मक दर में कोई सांख्यिकीय अंतर नहीं था।
तालिका 3 16 दवाओं के विस्तृत रोगाणुरोधी प्रतिरोध प्रोफाइल को सूचीबद्ध करती है।16 सीआर-एचवीकेपी आइसोलेट्स ने बहु-दवा प्रतिरोध दिखाया।सभी आइसोलेट्स का इलाज एम्पीसिलीन, एम्पीसिलीन/सल्बैक्टम, सेफ़ोपेराज़ोन/सल्बैक्टम, पिपेरासिलिन/टाज़ोबैक्टम, सेफ़ाज़ोलिन, सेफ़्यूरॉक्सिम, सेफ़ाज़िडाइम, सेफ्ट्रिएक्सोन, सेफ़ेपाइम, सेफ़ॉक्सिटिन, इमिपेनम और मेरोपेनेम से किया गया था।ट्राइमेथोप्रिम-सल्फामेथोक्साज़ोल में सबसे कम प्रतिरोध दर (43.8%) थी, इसके बाद एमिकासिन (62.5%), जेंटामाइसिन (68.8%) और सिप्रोफ्लोक्सासिन (87.5%) का स्थान था।
विषाणु-संबंधी जीन, रोगाणुरोधी प्रतिरोध जीन, कैप्सुलर सीरोटाइप जीन और 16 CR-hvKP आइसोलेट्स के MLST का वितरण चित्र 1 में दिखाया गया है। कुछ विषाणु-संबंधी जीन, रोगाणुरोधी प्रतिरोध जीन और कैप्सुलर सीरोटाइप जीन के agarose gel वैद्युतकणसंचलन के परिणाम हैं चित्र 1 में दिखाया गया है। चित्रा 2। एमएलएसटी विश्लेषण कुल 3 एसटी दिखाता है, एसटी 11 सबसे प्रभावशाली एसटी (87.5%, 14/16) है, इसके बाद एसटी 23 (6.25%, 1/16) और एसटी 86 (6.25%, 1 /16)।wzi टाइपिंग के परिणामों के अनुसार, 4 अलग-अलग कैप्सुलर सीरोटाइप की पहचान की गई (चित्र 1)।16 कार्बापेनम-प्रतिरोधी hvKP आइसोलेट्स में, K64 सबसे आम सीरोटाइप (n=13) है, इसके बाद K1 (n=1), K2 (n=1) और K47 (n=1) का स्थान आता है।इसके अलावा, कैप्सुलर सीरोटाइप K1 स्ट्रेन ST23 है, कैप्सुलर सीरोटाइप K2 स्ट्रेन ST86 है, और K64 के शेष 13 स्ट्रेन और K47 के 1 स्ट्रेन सभी ST11 हैं।16 CR-hvKP आइसोलेट्स में 9 विषाणुजनित जीनों की सकारात्मक दर चित्र 1 में दिखाई गई है, विषाणु-संबंधी जीन entB, fimH, rmpA2, iutA, और iucA 16 CR-hvKP उपभेदों में मौजूद हैं, इसके बाद mrkD (n =) 14), आरएमपीए (एन = 13), एयरोबैक्टीरिन (एन = 2), ऑल एस (एन = 1)।16 सीआर-एचवीकेपी सभी को कार्बापेनमेस जीन ब्लैकेपीसी-2 और विस्तारित-स्पेक्ट्रम β-लैक्टामेज जीन ब्लैएसएचवी को अलग करता है।16 CR-hvKP आइसोलेट्स में कार्बापेनम जीन blaNDM, blaVIM, blaIMP, blaOXA-48 और विस्तारित-स्पेक्ट्रम β-lactamase जीन blaTEM, blaCTX-M-2 समूह और blaCTX-M-8 समूह नहीं थे।16 CR-hvKP उपभेदों में, 5 उपभेदों ने विस्तारित-स्पेक्ट्रम β-lactamase जीन blaCTX-M-1 समूह को आगे बढ़ाया, और 6 उपभेदों ने विस्तारित-स्पेक्ट्रम β-lactamase जीन blaCTX-M-9 समूह को आगे बढ़ाया।
चित्र 1 विषाणु-संबंधी जीन, रोगाणुरोधी प्रतिरोध जीन, कैप्सुलर सीरोटाइप जीन और 16 CR-hvKP के MLST आइसोलेट्स।
चित्र 2 कुछ विषाणु-संबंधी जीन, रोगाणुरोधी प्रतिरोध जीन और कैप्सुलर सीरोटाइप जीन के एग्रोसे जेल वैद्युतकणसंचलन।
नोट: एम, डीएनए मार्कर;1, blaKPC (893bp);2, ईएनटीबी (400बीपी);3, आरएमपीए2 (609bp);4, आरएमपीए (429बीपी);5, आईयूसीए (239बीपी);6, आईयूटीए (880bp);7, एरोबैक्टीरिन (556bp);8, K1 (1283bp);9, K2 (641bp);10, सभी एस (508bp);11, एमआरसीडी (340bp);12, एफआईएमएच (609bp)।
ERIC-PCR का उपयोग 16 CR-hvKP आइसोलेट्स की समरूपता का विश्लेषण करने के लिए किया गया था।पीसीआर प्रवर्धन और agarose जेल वैद्युतकणसंचलन के बाद, 3-9 डीएनए टुकड़े होते हैं।फ़िंगरप्रिंटिंग परिणामों से पता चला है कि 16 CR-hvKP आइसोलेट्स अत्यधिक बहुरूपी थे, और आइसोलेट्स (चित्र 3) के बीच स्पष्ट अंतर थे।
हाल के वर्षों में, सीआर-एचवीकेपी आइसोलेट्स पर अधिक से अधिक रिपोर्टें आई हैं।सीआर-एचवीकेपी आइसोलेट्स की उपस्थिति सार्वजनिक स्वास्थ्य के लिए एक बड़ा खतरा बन गई है क्योंकि वे स्वस्थ लोगों में गंभीर, मुश्किल से इलाज करने वाले संक्रमण का कारण बन सकते हैं।इस अध्ययन में, 2019 से 2020 तक शंघाई के एक तृतीयक अस्पताल में सीआर-एचवीकेपी की व्यापकता और आणविक महामारी विज्ञान विशेषताओं का अध्ययन यह आकलन करने के लिए किया गया था कि क्या इस क्षेत्र में सीआर-एचवीकेपी के प्रकोप और इसके विकास की प्रवृत्ति का खतरा है।साथ ही, यह अध्ययन नैदानिक ​​संक्रामकता का अधिक व्यापक मूल्यांकन प्रदान कर सकता है, जो ऐसे आइसोलेट्स के आगे प्रसार को रोकने के लिए बहुत महत्वपूर्ण है।
इस अध्ययन ने 2019 से 2020 तक सीआर-एचवीकेपी के नैदानिक ​​वितरण और प्रवृत्ति का पूर्वव्यापी विश्लेषण किया। 2019 से 2020 तक, सीआर-एचवीकेपी आइसोलेट्स ने एक बढ़ती हुई प्रवृत्ति दिखाई।2019 में लगभग 31.2% (5/16) CR-hvKP को अलग-थलग कर दिया गया था, और CR-hvKP के 68.8% (11/16) को 2020 में अलग कर दिया गया था, जो कि साहित्य में रिपोर्ट किए गए CR-hvKP के ऊपर की ओर रुझान के अनुरूप है।झांग एट अल के बाद से।पहली बार 2015 में सीआर-एचवीकेपी का वर्णन किया गया, 10 से अधिक सीआर-एचवीकेपी साहित्य की सूचना दी गई है, 17-20 मुख्य रूप से एशिया-प्रशांत क्षेत्र में, विशेष रूप से चीन में।सीआर-एचवीकेपी सुपर विषाणु और बहु-दवा प्रतिरोध के साथ एक सुपर जीवाणु है।यह लोगों के स्वास्थ्य के लिए हानिकारक है और उच्च मृत्यु दर है।इसलिए इस पर ध्यान दिया जाना चाहिए और इसके प्रसार को रोकने के उपाय किए जाने चाहिए।
16 सीआर-एचवीकेपी आइसोलेट्स के एंटीबायोटिक प्रतिरोध विश्लेषण ने एंटीबायोटिक प्रतिरोध की उच्च दर दिखाई।सभी आइसोलेट्स का इलाज एम्पीसिलीन, एम्पीसिलीन/सल्बैक्टम, सेफ़ोपेराज़ोन/सल्बैक्टम, पिपेरासिलिन/टाज़ोबैक्टम, सेफ़ाज़ोलिन, सेफ़्यूरॉक्सिम, सेफ़ाज़िडाइम, सेफ्ट्रिएक्सोन, सेफ़ेपाइम, सेफ़ॉक्सिटिन, इमिपेनम और मेरोपेनेम से किया गया था।ट्राइमेथोप्रिम-सल्फामेथोक्साज़ोल में सबसे कम प्रतिरोध दर (43.8%) थी, इसके बाद एमिकासिन (62.5%), जेंटामाइसिन (68.8%) और सिप्रोफ्लोक्सासिन (87.5%) का स्थान था।लिंगलिंग झान और अन्य द्वारा अध्ययन किए गए सीआर-एचएमकेपी की प्रतिरोध दर इस अध्ययन के समान है [12]।सीआर-एचवीकेपी से संक्रमित मरीजों में कई बुनियादी बीमारियां, कम प्रतिरोधक क्षमता और कमजोर स्वतंत्र नसबंदी क्षमता होती है।इसलिए, रोगाणुरोधी संवेदनशीलता परीक्षण के परिणामों के आधार पर समय पर उपचार बहुत महत्वपूर्ण है।यदि आवश्यक हो, संक्रमित साइट को जल निकासी, मलबे और अन्य तरीकों से पाया और इलाज किया जा सकता है।
39 CR-hmKP आइसोलेट्स को स्टिकी स्ट्रिंग की लंबाई के अनुसार दो समूहों में विभाजित किया गया था।उनमें से, चिपचिपा स्ट्रिंग लंबाई 25 मिमी के साथ 20 सीआर-एचएमकेपी आइसोलेट्स को एक समूह में विभाजित किया गया था, और 19 सीआर-एचएमकेपी चिपचिपा स्ट्रिंग लंबाई> 25 मिमी के साथ दूसरे समूह में विभाजित किया गया था।दो समूहों के बीच सीआर-एचएमकेपी विषाणु-संबंधी जीन की सकारात्मक दरों की तुलना करते हुए, दो समूहों के बीच विषाणु जीन की सकारात्मक दरों में कोई सांख्यिकीय रूप से महत्वपूर्ण अंतर नहीं था।लिन ज़ी एट अल द्वारा अनुसंधान।ने दिखाया कि क्लेबसिएला न्यूमोनिया के विषाणु जीन की सकारात्मक दर क्लासिक क्लेबसिएला न्यूमोनिया की तुलना में काफी अधिक थी।21 हालाँकि, क्या विषाणु जीन की सकारात्मक दर चिपचिपी श्रृंखला की लंबाई के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध है या नहीं यह स्पष्ट नहीं है।अन्य अध्ययनों से पता चला है कि क्लासिक क्लेबसिएला न्यूमोनिया भी अत्यधिक विषैला क्लेबसिएला न्यूमोनिया हो सकता है, जिसमें विषाणु जीन की उच्च सकारात्मक दर होती है।22 इस अध्ययन में पाया गया कि सीआर-एचएमकेपी की विषाणु जीन सकारात्मक दर बलगम की लंबाई के साथ सकारात्मक रूप से सहसंबद्ध नहीं है।स्ट्रिंग (या स्टिकी स्ट्रिंग की लंबाई के साथ नहीं बढ़ती है)।
इस अध्ययन के ईआरआईसी पीसीआर फिंगरप्रिंट बहुरूपी हैं, और रोगियों के बीच कोई नैदानिक ​​​​क्रॉसओवर नहीं है, इसलिए सीआर-एचवीकेपी संक्रमण वाले 16 रोगी छिटपुट मामले हैं।अतीत में, सीआर-एचवीकेपी के कारण होने वाले अधिकांश संक्रमणों को पृथक या छिटपुट मामलों के रूप में सूचित किया गया है, 23,24 और सीआर-एचवीकेपी के छोटे पैमाने पर प्रकोप साहित्य में दुर्लभ हैं।11,25 ST11 CRKP में सबसे आम ST11 है और चीन में CR-hvKP आइसोलेट्स है।26,27 हालांकि ST11 CR-hvKP इस अध्ययन में 16 CR-hvKP आइसोलेट्स में से 87.5% (14/16) के लिए जिम्मेदार है, यह नहीं माना जा सकता है कि 14 ST11 CR-hvKP स्ट्रेन एक ही क्लोन से हैं, इसलिए ERIC PCR फिंगरप्रिंटिंग आवश्यक है।गृहविज्ञान विश्लेषण।
इस अध्ययन में, सीआर-एचवीकेपी से संक्रमित सभी 16 रोगियों की इनवेसिव सर्जरी हुई।रिपोर्टों के अनुसार, CR-hvKP11 के कारण वेंटिलेटर से जुड़े निमोनिया के घातक प्रकोप से संकेत मिलता है कि आक्रामक प्रक्रियाओं से CR-hvKP संक्रमण का खतरा बढ़ सकता है।वहीं, सीआर-एचवीकेपी से संक्रमित 16 रोगियों में अंतर्निहित बीमारियां हैं, जिनमें सेरेब्रोवास्कुलर रोग सबसे आम हैं।पिछले एक अध्ययन से पता चला है कि सेरेब्रोवास्कुलर रोग सीआर-एचवीकेपी संक्रमण के लिए एक महत्वपूर्ण स्वतंत्र जोखिम कारक है।28 इस घटना का कारण सेरेब्रोवास्कुलर रोग के रोगियों की कमजोर प्रतिरक्षा हो सकती है, रोगजनक बैक्टीरिया को स्वतंत्र रूप से बाहर नहीं किया जा सकता है, और केवल उनके जीवाणुनाशक प्रभाव पर भरोसा किया जाता है।एंटीबायोटिक्स लंबे समय में बहु-दवा प्रतिरोध और हाइपरवायरुलेंस के संयोजन को जन्म देंगे।16 रोगियों में से 9 की मृत्यु हो गई, और मृत्यु दर 56.3% (9/16) थी।पिछले अध्ययनों में मृत्यु दर 10,12 से अधिक है, और पिछले अध्ययनों में रिपोर्ट की गई 11,21 से कम है।16 रोगियों की औसत आयु 83.1±10.5 वर्ष थी, यह दर्शाता है कि बुजुर्ग सीआर-एचवीकेपी के प्रति अधिक संवेदनशील हैं।पिछले अध्ययनों से पता चला है कि युवा लोग संक्रमण के प्रति अधिक संवेदनशील होते हैं।क्लेबसिएला न्यूमोनिया का विषाणु।29 हालांकि, अन्य अध्ययनों से पता चला है कि बुजुर्ग अत्यधिक विषाणु वाले क्लेबसिएला न्यूमोनिया के लिए अतिसंवेदनशील होते हैं24,28।यह अध्ययन इसी के अनुरूप है।
16 सीआर-एचवीकेपी उपभेदों में, एक एसटी23 सीआर-एचवीकेपी और एक एसटी86 सीआर-एचवीकेपी को छोड़कर, अन्य 14 स्ट्रेन सभी एसटी11 सीआर-एचवीकेपी हैं।ST23 CR-hvKP के अनुरूप कैप्सुलर सीरोटाइप K1 है, और ST86 CR-HVKP का संबंधित कैप्सुलर सीरोटाइप K2 है, जो पिछले अध्ययनों के समान है।30-32 ST23 (K1) CR-hvKP या ST86 (K2) CR-hvKP से संक्रमित मरीजों की मृत्यु हो गई, और मृत्यु दर (100%) ST11 CR-hvKP (50%) से संक्रमित रोगियों की तुलना में काफी अधिक थी।जैसा कि चित्र 1 में दिखाया गया है, विषाणु-संबंधी जीनों के ST23 (K1) या ST86 (K2) उपभेदों की सकारात्मक दर ST11 (K64) उपभेदों की तुलना में अधिक है।मृत्यु दर विषाणु-संबंधी जीन की सकारात्मक दर से संबंधित हो सकती है।इस अध्ययन में, सीआर-एचवीकेपी के सभी 16 उपभेदों में कार्बापेनमेस जीन ब्लैकेपीसी-2 और विस्तारित-स्पेक्ट्रम β-लैक्टामेज जीन ब्लाएसएचवी होते हैं।blaKPC-2 चीन में CR-hvKP में सबसे आम कार्बापेनमेज़ जीन है।33 झाओ एट अल के अध्ययन में, 25blaSHV उच्चतम सकारात्मक दर वाला विस्तारित-स्पेक्ट्रम β-lactamase जीन है।वायरलेंस जीन entB, fimH, rmpA2, iutA, और iucA सभी 16 CR-hvKP आइसोलेट्स में मौजूद हैं, इसके बाद mrkD (n=14), rmpA (n=13), एनारोबिसिन (n=2), allS (n= 1), जो पिछले अध्ययन के समान है।34 कुछ अध्ययनों से पता चला है कि rmpA और rmpA2 (म्यूकस फेनोटाइप जीन के न्यूनाधिक) कैप्सुलर पॉलीसेकेराइड के स्राव को बढ़ावा दे सकते हैं, जिससे हाइपरम्यूकॉइड फेनोटाइप और बढ़े हुए पौरुष पैदा होते हैं।35 एरोबैक्टीरिन आईयूसीएबीसीडी जीन द्वारा एन्कोडेड होते हैं, और उनके समरूप रिसेप्टर्स को आईयूटीए जीन द्वारा एन्कोड किया जाता है, इसलिए उनके पास जी मेलोनेला संक्रमण परख में उच्च स्तर का विषाणु होता है।allS K1-ST23 का एक मार्कर है, pLVPK में नहीं, pLVPK K2 सुपर पौरुष प्रकार से एक विषाणुजनित प्लास्मिड है।allS एक HTH टाइप ट्रांसक्रिप्शन एक्टिवेटर है।ये विषाणुजनित जीन विषाणु में योगदान करने के लिए जाने जाते हैं और उपनिवेश, आक्रमण और रोगजनकता के लिए जिम्मेदार होते हैं।36
यह अध्ययन शंघाई, चीन में सीआर-एचवीकेपी की व्यापकता और आणविक महामारी विज्ञान का वर्णन करता है।हालांकि सीआर-एचवीकेपी के कारण होने वाला संक्रमण छिटपुट है, लेकिन यह साल दर साल बढ़ रहा है।परिणाम पिछले शोध का समर्थन करते हैं और दिखाते हैं कि ST11 CR-hvKP चीन में सबसे लोकप्रिय CR-hvKP है।ST23 और ST86 CR-hvKP ने ST11 CR-hvKP की तुलना में अधिक विषाणु दिखाया, हालांकि वे दोनों अत्यधिक विषाणु वाले क्लेबसिएला न्यूमोनिया हैं।जैसे-जैसे अत्यधिक विषैले क्लेबसिएला न्यूमोनिया का प्रतिशत बढ़ता है, क्लेबसिएला न्यूमोनिया की प्रतिरोध दर कम हो सकती है, जिससे नैदानिक ​​अभ्यास में अंधा आशावाद पैदा होगा।इसलिए, क्लेबसिएला न्यूमोनिया के विषाणु और दवा प्रतिरोध का अध्ययन करना आवश्यक है।
इस अध्ययन को शंघाई फिफ्थ पीपुल्स हॉस्पिटल (नंबर 104, 2020) की मेडिकल एथिक्स कमेटी द्वारा अनुमोदित किया गया था।नैदानिक ​​नमूने नियमित अस्पताल प्रयोगशाला प्रक्रियाओं का हिस्सा हैं।
इस अध्ययन के लिए तकनीकी मार्गदर्शन प्रदान करने के लिए शंघाई फिफ्थ पीपुल्स हॉस्पिटल की केंद्रीय प्रयोगशाला के सभी कर्मचारियों को धन्यवाद।
इस काम को मिन्हांग जिला, शंघाई के प्राकृतिक विज्ञान फाउंडेशन (अनुमोदन संख्या: 2020MHZ039) द्वारा समर्थित किया गया था।
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